穿梭、明暗箱回避實(shí)驗(yàn)方法 —— 主動(dòng)回避與被動(dòng)回避

回避實(shí)驗(yàn)是一類經(jīng)典的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，主要利用小鼠趨暗避光（明暗箱穿梭）以及對(duì)厭惡刺激（如足底輕微電擊）的恐懼和記憶反應(yīng)來(lái)建立模型。從實(shí)驗(yàn)者的角度看，其技術(shù)原理與條件性恐懼實(shí)驗(yàn)相近。實(shí)驗(yàn)所用刺激一般為輕度電擊，動(dòng)物通過(guò)學(xué)習(xí)逐漸表現(xiàn)出對(duì)電擊區(qū)域的回避。根據(jù)動(dòng)物的反應(yīng)方式，實(shí)驗(yàn)分為 主動(dòng)回避（主動(dòng)逃離刺激環(huán)境） 和 被動(dòng)回避（抑制進(jìn)入帶有厭惡刺激的環(huán)境）。此外，按照實(shí)驗(yàn)裝置不同，還可分為穿梭回避、跳臺(tái)回避和Y型迷宮回避，本節(jié)主要介紹穿梭回避與跳臺(tái)回避兩種方式。

（1）穿梭回避裝置
實(shí)驗(yàn)常用的穿梭箱由箱體、刺激控制器及計(jì)算機(jī)組成。以美國(guó) Med Associates 公司生產(chǎn)的 ENV-010MC 型穿梭箱為例：該裝置分為左右兩個(gè)等大隔室（20.3×15.9×21.3 cm），其中一側(cè)可套黑色遮布作為暗箱（主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)中可不必使用）。兩個(gè)隔室之間通過(guò)拱形門(mén)（8.9×11.4 cm）相連，實(shí)驗(yàn)時(shí)可根據(jù)需要開(kāi)合。地板為不銹鋼柵欄（大鼠直徑約4.8 mm，小鼠約3.175 mm）。暗箱側(cè)的柵欄與電刺激器連接，可施加電流；明箱側(cè)則不帶電。

（2）跳臺(tái)回避裝置
將穿梭箱中間的門(mén)移除并替換為平臺(tái)，即可轉(zhuǎn)化為跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)裝置。這里介紹的是美國(guó) Coulbourn 公司研發(fā)的跳臺(tái)設(shè)備：由透明有機(jī)玻璃箱（15×25×10 cm）、隔音外箱（48×62×24 cm）以及脈沖電刺激器構(gòu)成。箱底同樣為金屬柵欄并與刺激器相連，中央設(shè)置一木制平臺(tái)（3.5×3.5×2.5 cm）。實(shí)驗(yàn)時(shí)需將裝置放入隔音外箱，以屏蔽外部干擾。

（1）小鼠穿梭被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)（step-through passive avoidance）

1. 訓(xùn)練階段

• 將小鼠放入明箱，10 秒后開(kāi)啟通道門(mén)。因小鼠天性喜暗避光，大多數(shù)個(gè)體會(huì)很快進(jìn)入暗箱。

• 當(dāng)小鼠四肢完全進(jìn)入暗箱后，立即關(guān)上通道門(mén)并施加一次電擊。電擊強(qiáng)度設(shè)為可引起小鼠退縮并發(fā)聲的最小電流，通常為 0.2–0.8 mA（100 V，50–60 Hz AC），持續(xù) 1–2 秒。

• 保持小鼠在暗箱內(nèi)停留約 10 秒，以形成“暗箱–電擊”的聯(lián)結(jié)記憶。隨后將其取出放回籠內(nèi)，并清潔裝置以便進(jìn)行下一只動(dòng)物訓(xùn)練。

2. 記憶保持測(cè)試
   在訓(xùn)練 24 小時(shí)后，將小鼠再次放入明箱并開(kāi)啟通道門(mén)，但不再給予電擊。記錄其進(jìn)入暗箱的潛伏期及行為表現(xiàn)，用以評(píng)估學(xué)習(xí)與記憶水平。